Sikojen ripulirokotteen loppupään puhdistusprosessi

Ripuli on yksi kolmesta suurimmasta taudista, jotka ovat aiheuttaneet suuria taloudellisia tappioita sikateollisuudelle Kiinassa. Sioilla ripulia aiheuttavat monet tekijät, ja virustekijät ovat vakavimpia. Kaiken ikäiset siat voivat saada tartunnan, erityisesti imevät porsaat, ja kuolleisuus tartunnan jälkeen voi olla yli 50 %. Sikojen epidemia-ripulivirus (PEDV) ja sian tarttuva gastroenteriittivirus (TGEV) ovat laajalle levinneitä maailmassa, ja nämä kaksi virusta voivat saada tartunnan yksittäin tai yhdistelmänä. Tällä hetkellä ei ole olemassa erityisiä lääkkeitä PEDV:n ja TGEV:n hoitoon, ja sian ripulin ehkäisy ja valvonta ovat pääasiassa kaupallisia rokotteita.

Perinteiset rokotteet sikojen epidemiaa ripulia vastaan ​​sisältävät pääasiassa koko viruksen inaktivoidun rokotteen ja elävän heikennetyn rokotteen. Kliinisesti yleisesti käytetään PEDV- ja TGEV-tandem-inaktivoitua rokotetta tai heikennettyä rokotetta sekä PEDV-, TGEV- ja sian rotaviruksen (RV) kolmoisinaktivoitua rokotetta tai heikennettyä rokotetta, enimmäkseen PEDV- ja TGEV-tandemrokote.

Tällä hetkellä Kiinassa on monia rokotteita sikojen epidemiaa ripulia vastaan.

Inaktivoitujen ja heikennettyjen rokotteiden tuotantoprosessi on samanlainen, sisältäen pääasiassa viisi vaihetta taudinaiheuttajan viljelystä, patogeenin inaktivoinnista tai heikennetystä, taudinaiheuttajien erottamisesta ja puhdistamisesta, rokotteen valmistuksesta ja pakkaamisesta sekä rokotteiden laadunvalvonnasta. Tämä artikkeli esittelee pääasiassa patogeenien puhdistusmenettelyn.

Selvennys

Selkeyttämisen tarkoituksena on varmistaa solujätteen ja muiden suurten hiukkasaggregaattien poisto. Erilaisten myrkkyjen soluviljelytuotannossa on sen lisäksi, että se sisältää suuren määrän viruspartikkeleita, paljon solukudosjätteitä ja aineenvaihduntatuotteita ja muita epäpuhtauksia, jolloin myrkky on sameaa tai puolipilvistä, Tämän myrkkykonsentraatiotoiminnon käyttö tekee pian ultrasuodatuskalvon tukossa, eikä se voi suorittaa myrkyn keskittymistä, mikä johtaa ultrasuodatuskalvon romuun. Siksi, ennen kuin myrkky väkevöidään, se on ensin kirkastettava, mikä yleensä tehdään hitaalla sentrifugoinnilla ja kalvosuodatuksella. On huomattava, että kalvoerotusteknologiaa käytettäessä, koska kalvomateriaalissa on usein elektronegatiivisia tai hydrofobisia ryhmiä, on tarpeen tutkia, onko kalvon materiaalilla adsorptiota viruspartikkeleihin.

Tehokas selkeytysvaihe vaatii yhdistelmän korkeaa kiinteiden hiukkasten poistokapasiteettia ja korkeaa tuotesaantoa, helppoa vahvistusta ja myöhempien loppupään toimintayksiköiden suojaamista. Tällä hetkellä selkeytyksessä käytetään syväsuodatinta.

Kuitenkin, kun viljelymittakaava on liian suuri, tarvitaan suuri määrä syviä suodatinkalvoja, mikä johtaa kuluvien tarvikkeiden kustannusten huomattavaan nousuun. Samaan aikaan soluviljelmän suuri tiheys vähentää syväsuodatinkalvon kuormitusta, mikä lisää kustannuksia ja tuotteen liiallista laimentumista.

Mikrosuodatusmenetelmässä käytetään pääasiassa tangentiaalivirtaussuodatuslaitetta, ja kalvokomponentit ovat litteäkalvokassettia ja onttokuitua. Tangentiaalista virtaussuodatusta (TFF) ohjaa kalvon läpi kulkeva paine-ero. Kalvon huokoskokoa pienemmät aineet ja epäpuhtaudet kulkevat kalvon läpi, kun taas epäpuhtaudet, kuten solut, joissa on suurempia hiukkasia, jäävät loukkuun. Mikrosuodatukseen käytetyn kalvon huokoskoko on {{0}},45/0,22 μm. Onttokuituisen tangentiaalivirtausmikrosuodatus voi suoraan käsitellä korkean kiintoainepitoisuuden nesteitä, kuten suuritiheyksisiä soluviljelyalustoja, poistaa sentrifugointi- ja esisuodatusvaiheet harvemmilla vaiheilla ja yksinkertaisella toiminnalla, kalvoa voidaan käyttää toistuvasti puhdistuksessa, mikä vähentää laiteinvestointeja ja käyttöä kustannukset modulaarisen automatisoidun tuotannon vaatimusten mukaisesti.

Keskittäminen ja puhdistus

Alustavan selvityksen jälkeen virusviljelyalusta sisältää edelleen suuren määrän epäpuhtauksia, mukaan lukien vialliset partikkelit, viruskuori, sytotoksiini, elatusaine, seerumi ja solufragmentit jne. Jos näitä epäpuhtauksia ruiskutetaan eläimiin, ne eivät vaikuta ainoastaan ​​lääkkeen tehoon. rokotteen, mutta myös aiheuttaa voimakkaan immuunivasteen isännässä ja jopa johtaa rokotettujen eläinten kuolemaan. Siksi väkevöinti ja puhdistus ovat tarpeen epäpuhtauksien, kuten heteroproteiinien ja solufragmenttien, poistamiseksi, tehokkaiden immuunivasteiden tehostamiseksi ja indusoimiseksi, käytetyn rokotteen määrän vähentämiseksi ja haittavaikutusten vähentämiseksi.

Viruksen puhdistamisen periaate: viruksen biologisen aktiivisuuden ja tarttuvuuden ylläpitäminen lähtökohtana, viruksen epäpuhtauksien poistaminen ja viruksen korkean puhtauden erottaminen.

Tällä hetkellä tärkeimmät suurtuotannon väkevöinti- ja puhdistusmenetelmät ovat ultrasuodatus.

Ultrasuodatusmenetelmä, jossa käytetään pääasiassa tangentiaalivirtausta ultrasuodatuslaitetta, onttokuitusuodatusjärjestelmää ja muita suodatuslaitteita, normaaleissa olosuhteissa ultrasuodatusmenetelmän soveltaminen voi saada viruksen keskittymään yli 100 kertaa, heteroproteiinin poistonopeus jopa 99%. Niistä onttokuitukalvosuodatustekniikalla on etuja lievä ja pieni leikkausvoima, helppo kytkeminen, joustava toiminta, pitkä käyttöikä ja alhaiset kustannukset sekä helppo vahvistus, joten on suositeltavaa valita ontto kuitu viruksen väkevöintiin ja puhdistamiseen.

Ultrasuodatusmenetelmää käytettäessä väkevöintiin ja puhdistukseen on erittäin tärkeää valita sopiva kalvon huokoskoko, joka määrää suoraan konsentraation tehokkuuden ja laadun. Toisaalta on välttämätöntä valita kalvon aukko, jotta kohdemolekyylit saadaan tehokkaasti vangittua saannon varmistamiseksi, ja toisaalta heteroproteiinien poistovaikutus ja prosessointinopeus tulisi ottaa täysin huomioon. Siksi paras periaate on valita kalvo, jolla on suurin huokoskoko, joka voi vangita kohdemolekyylin, ja yrittää valita suodatinkalvo, jolla on tasainen huokoskokojakauma.

Porcine Epidemic Dirrhea virus (PEDV) ja transmissible gastroenteritis virus (TGEV) ovat molemmat koronaviruksia, jotka ovat polymorfisia palloja, joissa on ylösalaisin piikkimäiset piikit, joiden halkaisija vaihtelee välillä 60-190 nm. Rotavirustauti on zoonoottinen sairaus, jossa rotavirus (RV) näyttää pyörän kaltaiselta ja on halkaisijaltaan noin 70 nm. Nämä kolme virusta voidaan yleensä siepata käyttämällä 100-750kd-aperture-ultrasuodatuskalvoja.

Guidling Technology on valtakunnallinen korkean teknologian yritys, joka keskittyy biofarmaseuttisiin valmisteisiin, soluviljelyyn, biolääketieteen puhdistukseen ja konsentroimiseen, diagnoosiin ja teollisuusnesteisiin. Olemme onnistuneesti kehittäneet keskipakosuodatinlaitteita, ultrasuodatus- ja mikrosuodatuskasetteja, virussuodattimia, TFF-järjestelmiä, syvyyssuodattimia, onttoja kuituja jne., jotka täyttävät täysin biofarmaseuttisten tuotteiden, soluviljelyn ja niin edelleen sovellusskenaariot. Kalvojamme ja kalvosuodattimiamme käytetään laajasti esisuodatuksen, mikrosuodatuksen, ultrasuodatuksen ja nanosuodatuksen tiivistämiseen, uuttamiseen ja erottamiseen. Monet tuotelinjamme pienestä kertakäyttöisestä laboratoriosuodatuksesta tuotannon suodatusjärjestelmiin, steriiliystestaukseen, fermentointiin, soluviljelyyn ja muuhun vastaavat testauksen ja tuotannon tarpeita. Guidling Technology odottaa innolla yhteistyötä kanssasi!